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倒序阅读, 只看楼主, 0 发表于: 2010-11-01
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[其他] 小鼠胚胎干细胞培养方法

本帖被 盗盗茶 设置为精华(2010-11-02)
小鼠胚胎干细胞培养方法

事件:
新手初次培养小鼠胚胎干细胞,不甚了解,请问大虾们是如何培养的呢?培养基如何配置,MEF是自己提取还是找公司买呢?如何传代,冻存,复苏?新手求教!!

参考一:
我培养过D3和导师从北大要的一个细胞系不知道是那个,老鼠是昆白,实验室统一买来,然后交配,用胎鼠分离MEF。MEF培养基就是普通培养基,主要是高糖DMEM+小牛血清。如果培养mES需要用FBS.通常2-3天传代,具体很多想不起来了。

参考二:
现在胚胎干细胞是一个热点,我们国家在这方面投入很大,但是胚胎干细胞的基础培养技术很多新手都没有熟练,我想请做过胚胎干细胞的朋友们在这里写出你们懂得经验,比如说培养基的组成配比配置,干细胞培养注意点,这样可以培训我这样的新手哦,谢谢楼上的朋友的解答!

参考三:
做干细胞实验关键是实验条件和技术经验,但这个话题范围太广,不好一一解释,感兴趣的朋友可以到下面这个网站去查询一下相关的技术资料,相信会有所收获。做干细胞实验是个烧钱的活,对技术的掌握是提高效率和降低实验成本的关键,之前多做些准备,将会事半功备。
http://cyagen.com.cn/Newslist2.asp?id=12

参考四:
这发明文献比较多,国内外都有人做过。
建议你去看看这两本书《小鼠胚胎操作实验手册》和《体外培养原理与技术》


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