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cardy 离线

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倒序阅读, 只看楼主, 0 发表于: 2010-11-01
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[其他] 蛋白电泳图

本帖被 盗盗茶 设置为精华(2010-11-02)
事件:
我跑SDS-PAGE电泳,跑的图都不怎么好看,怎样才能怎样跑出好看的蛋白电泳图?

参考一:
怎么不好看法,具体问题具体解决,
1,胶 的配置 ,不要有异物,胶要均匀,平整
2,上样需注意
3,缓冲液,槽子,要干净
4,染色,染色液不要有杂质,染脱时间长点
要根据你目的蛋白的分子选择合适浓度的SDS-PAGE进行电泳。
板子最好弄到很干净,不要有渍在上面,或者留有纸屑什么的都会有影响,然后就是配置的时候一定要混合好,在下层胶配置的时候要压平,还有加样的时候要注意样本的量最好一样,还有如果有浓度特别大的蛋白有可能把旁边的样本挤的很歪的

参考二:
首先先说最基本的,做胶:
1.确定配胶所用成分均是好用的
2.胶内不能有气泡
3.胶凝的时间要达到标准时间,时间不足,胶凝的不充分,条带不清晰
其次,上样:
上样也是很有讲究的,每孔上样量不能过多,上样量过大,条带跑出后宽窄不一,而且会占取其他泳道,计算出你的蛋白浓度后,按照标准上样量加样即可,切记贪多;上样时,要使样品均一,加样力道要均匀,使样品均匀快速下降。
再次,电泳过程:
电泳前,要保证装胶板的支架底部不能有气泡,且在整个电泳过程中均要保证不能有大气泡的存在,若有大气泡产生应及时排出,否则胶跑完后,条带会呈现一个弧度。
最后,就是脱色:脱色程度要把握好,过犹不及。

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